دانشگاه زابل

مدیریت تحصیلات تکمیلی پردیس خودگردان دانشگاه

دانشکده علوم پایه

گروه زیست شناسی

پایان نامه جهت اخذ درجه کارشناسی ارشد در رشته زیست شناسی- ژنتیک

عنوان:

تاثیر عصاره برگ  گیاه جغجغه(prosopis farcta) بر بیان ژن فسفوفروکتوکیناز-1در موش های صحرایی دیابتی (نوع 1)

اساتید راهنما:

دکتر حمیدرضا میری

دکتر محمد رضا حاجی نژاد

اساتید مشاور:

مهندس داوود نادری

مهندس هادی صبوری

فهرست مطالب:

فصل اول: مقدمه وکلیات

1-1- مقدمه—————————————————————— 2

2-1-کلیات تحقیق————————————————————- 3

1-2-1-دیابت—————————————————————– 3

2-2-1- انواع دیابت———————————————————— 3

3-2-1- علائم بروز دیابت——————————————————- 4

4-2-1- درمان دیابت :——————————————————— 5

3-1- گیاه جغجغه (Prosopis farcta)——————————————– 8

1-3-1- خواص دارویی جغجغه————————————————– 8

4-1- فسفوفروکتوکیناز 1(PFK-1):———————————————– 9

5-1- ضرورت و اهداف تحقیق :————————————————- 13

فصل دوم: مروری بر منابع

1-2- اثرات ضد دیابتی گیاهان————————————————– 16

1-1-2- انار—————————————————————– 17

2-1-2-مکانیسم اثر انار در دیابت:———————————————– 17

2-1-2- سیر—————————————————————- 19

2-2- اثر گیاه برفعالیت وبیان ژن———————————————— 21

فصل سوم: مواد و روشها

1-3- موادو روشها———————————————————— 25

2-3- تهیه عصاره هیدروالکلی برگ گیاه جغجغه———————————– 27

3-3- حیوانات آزمایشگاهی—————————————————– 28

1-3-3- نحوه گروهبندی:—————————————————— 28

2-3-3- روش القای دیابت تجربی:———————————————– 29

3-3-3- اندازه گیری قند و وزن موشها:——————————————- 29

4-3-3- مراحل انجام تشریح:————————————————— 29

4-3- بررسی بیان ژن——————————————————— 31

1-4-3- مشخصات توالی ژن PFK-1——————————————– 31

2-4-3- طراحی پرایمرها—————————————————— 35

3-4-3- آماده سازی پرایمر—————————————————- 35

5-3- استخراج RNA:——————————————————— 36

1-5-3- استخراج RNA از نمونه های تازه کبد توسط کیت Geneall Hybrid Rtm

1-5-3- بررسی کمیت و کیفیت RNA  استخراج شده—————————— 38

6-3- سنتز cDNA———————————————————–

1-6-3- سنتز cDNA توسط کیتThermo SCIENTIFIC——————–

7-3- واکنش های PCR——————————————————-

1-7-3 – PCR شیب دمایی—————————————————- 41

2-7-3- PCR معمولی——————————————————– 43

8-3- الکترفورز————————————————————– 45

1-8-3 – مواد مورد نیازجهت تهیه ژل الکتروفورز———————————– 45

1-1-8-3- آگارز————————————————————- 45

2-1-8-3- اتیدیوم بروماید—————————————————– 46

3-1-8-3- لودینگ بافر——————————————————– 46

4-1-8-3-طرز تهیه محلول Tris-Hcl——————————————–

4-1-8-3- شناساگرهای اندازهDNA———————————————

9-3- روش کار با ژل الکترفورز————————————————– 47

10-3- رسم منحنی استاندارد:————————————————– 48

10-3- واکنش Real-Time PCR———————————————–

11-3- Threshold و مقدار CT:————————————————-

12-3- تعیین توالی محصولات  (Direct Sequencing) PCR————————-

10-2-3- آنالیز بیان ژن——————————————————- 52

13-3- تجزیه وتحلیل داده ها————————————————— 52

فصل چهارم: نتایج و بحث

1-4- جمع آوری نمونه :——————————————————- 54

2-4- بررسی نتایج وزن موشهای مورد مطالعه————————————– 54

3-4- بررسی نتایج گلوکز ناشتای سرم موشهای مورد مطالعه————————– 56

5-4- نتایج استخراج RNA:—————————————————-

6-4- نتایج حاصل ازساخت cDNA بر روی ژل آگاروز——————————- 59

7-4-  نتایج تعیین غلظت و کیفیت RNA توسط اسپکتروفتومتری——————– 61

1-7-4-  نتایج مربوط به PCR شیب دمایی————————————— 61

8-4- نتایج منحنی استاندارد————————————————— 62

1-8-4- منحنی استاندارد ژن TBP———————————————-

2-8-4-منحنی استاندارد ژن PFK-1——————————————–

9-4- نتایج واکنش  Real Time PCR——————————————–

1-9-4- تکثیر ژنPFK——————————————————–

2-9-4-تکثیر ژن TBP——————————————————–

10-4- ارزیابی  کارایی تکثیر ژنهای مور مطالعه از طریق آنالیز منحنی ذوب:—— 66

1-10-4- منحنی تغییرات ذوب بر حسب دمای ژن  PFK—————————

2-10-4-منحنی تغییرات ذوب بر حسب دمای ژن TBP—————————–

11-4-  آنالیز منحنی ذوب ژن PFK———————————————

12-4-آنالیز منحنی ذوب ژن TBP———————————————-

13-4- نتایج حاصل از Real timePCR ژن PFK 1 بر روی ژل آگارز——————- 70

14-4- نتایج بررسی بیان ژن PK———————————————– 70

15-4- بحث:—————————————————————- 71

16-4- پیشنهادات———————————————————— 73

منابع:———————————————————————- 75

برای دانلود متن کامل پایان نامه اینجا کلیک کنید

لینک بالا اشتباه است

برای دانلود متن کامل اینجا کلیک کنید

       

:: بازدید از این مطلب : 613